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ELISA試劑盒抗原抗體反響后直接測定形成的沉積或濁度,敏感度可達 5~10μg/ml,但在查驗中,某些待測物在標本中的含量遠低于這一水平,因而要尋覓添加敏感度的辦法。符號的免疫測定是 將檢測試劑中的抗原或抗體用可微量測定的物質加以符號,經過測定符號物來進步敏感度。在放射免疫測定和酶免疫測定中,符號物別離 為放射性核素和酶,zui后用測定放射性和酶生機來核算待檢物的量,敏感度可比直接測定沉積物進步數(shù)百至數(shù)千倍。在符號免疫測定中, 一般參加過量的符號試劑以確保與待測物*反響。
ELISA試劑盒以符號抗體(Ab ※)檢測抗原(Ag)為例,反響式如下: Ag+ Ab※→ AgAb>※+ Ab※在反響產物中有與Ag結合的Ab※和游離和Ab※ ,如不將兩者分離而測定符號物,測得的成果將為兩者之和。因而,游離符號物與結合符號物的分離是符號免疫測定中的重要過程??刹?用多種手段,固相載體是其中之一。如將抗原或抗體包被在固相載體上,ELISA試劑盒然后再與符號的抗原或抗體直接反響,結合的符號物被固定在載 體上,而游離的符號物留于溶液中。這樣能夠經過洗刷將游離的Ab ※除掉,結合符號物的測定可在固相上進行。