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    免費(fèi)代測(cè)人 (Human) 血小板活化因子乙酰水解酶 (PAFA) ELISA 檢測(cè)試劑盒

    發(fā)布時(shí)間: 2014/5/7  點(diǎn)擊次數(shù): 561次
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    人 (Human) 血小板活化因子乙酰水解酶 (PAFA) ELISA 檢測(cè)試劑盒
    本試劑僅供研究使用  標(biāo)本:血清或血漿

    試驗(yàn)原理:
    PAFA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知PAFA濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將PAFA和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中PAFA的濃度呈比例關(guān)系。

    試劑盒內(nèi)容及其配制
    試劑盒成份(2-8℃保存)    96孔配置    48孔配置    配制
    96/48人份酶標(biāo)板    1塊板(96T)    半塊板(48T)    即用型
    塑料膜板蓋    1塊    半塊    即用型
    標(biāo)準(zhǔn)品:1600U/L    1瓶(0.6ml)    1瓶(0.3ml)    按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀稀
    空白對(duì)照    1瓶(1.0ml)    1瓶(0.5ml)    即用型
    標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液    1瓶(5ml)    1瓶(2.5ml)    即用型
    生物素標(biāo)記的抗PAFA抗體    1瓶(6ml)    1瓶(3.0ml)    即用型
    親和鏈酶素-HRP    1瓶(10ml)    1瓶(5.0ml)    即用型
    洗滌緩沖液    1瓶(20ml)    1瓶(10ml)    按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋
    底物A    1瓶(6.0ml)    1瓶(3.0ml)    即用型
    底物B    1瓶(6.0ml)    1瓶(3.0ml)    即用型
    終止液    1瓶(6.0ml)    1瓶(3.0ml)    即用型
    標(biāo)本稀釋液    1瓶(12ml)    1瓶(6.0ml)    即用型

    自備材料
    蒸餾水。
    加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
    振蕩器及磁力攪拌器等。

    安全性
    避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
    實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
    不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

    操作注意事項(xiàng)
    試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
    實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
    不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
    使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
    使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
    洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
    底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
    加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
    按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

    樣品收集、處理及保存方法
    血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
    血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
    細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
    組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
    保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

    試劑的準(zhǔn)備
    標(biāo)準(zhǔn)品:標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備,不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行:
    1600 U/L    (6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)    原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。
    800 U/L    (5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)    100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
    400 U/L    (4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)    100ul的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
    200 U/L    (3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)    100ul的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
    100 U/L    (2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)    100ul的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
    50 U/L    (1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品)    100ul的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
    0 U/L    (空白對(duì)照)    原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

    洗滌緩沖液(50×)的稀釋?zhuān)赫麴s水50倍稀釋。


    人 (Human) 血小板活化因子乙酰水解酶 (PAFA) ELISA 檢測(cè)試劑盒操作步驟
    使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
    根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
    加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
    甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
    每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
    甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
    每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
    取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
    在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

    建議使用的實(shí)驗(yàn)方案
        標(biāo)準(zhǔn)品濃度(U/L)    
    A    1600    1600    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品
    B    800    800    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品
    C    400    400    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品
    D    200    200    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品
    E    100    100    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品
    F    50    50    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品
    G    0    0    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品
    H    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品    樣品


    局限
    6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線(xiàn)性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)無(wú)法得到的結(jié)果。

    試劑盒性能
    1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線(xiàn)性。樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
    2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
    3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

    人 (Human) 血小板活化因子乙酰水解酶 (PAFA) ELISA 檢測(cè)試劑盒結(jié)果判斷與分析
    1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
    2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的PAFA標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線(xiàn),樣品的PAFA含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算出相應(yīng)的濃度。
    3、檢測(cè)值范圍:0-1600U/L
    4、敏感度: 1.0 U/L
    A02242    大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat soluble Toll-like receptor 2,sTLR-2 ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02243    大鼠前列腺素F2α(PGF2α)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02244    大鼠白三烯E4(LTE4)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02245    大鼠尿激酶(UK)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat urokinase,UK ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02246    大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)酶聯(lián)免疫試劑盒     ,英文名:    Rat coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02247    大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02248    大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02249    大鼠載脂蛋白H(Apo-H)酶聯(lián)免疫試劑盒     ,英文名:    Rat Apolipoprotein H,Apo-H ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02250    大鼠白介素2受體(IL-2R)酶聯(lián)免疫試劑盒     ,英文名:    Rat Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02251    大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)酶聯(lián)免疫試劑盒     ,英文名:    Rat adrenomedullin,ADM ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02252    大鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat Beta-Endorphin receptor,β-EPR ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02253    大鼠鈣/鈣調(diào)素依賴(lài)性蛋白激酶2(CAMK 2)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat calcium/calmodulin-dependent protein kinase-Ⅱ,CAMK 2 ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02254    大鼠肝脂酶(HL)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat hepatic lipase,HL ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02255    大鼠煙堿型乙酰膽堿受體(N-AChR)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat nicotinic acetylcholine receptor,N-AChR ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02256    大鼠毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)酶聯(lián)免疫試劑盒     ,英文名:    Rat muscarinic acetylcholine receptor,M-AChR ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02257    大鼠活化蛋白C(APC)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat activated protein C,APC ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02258    大鼠甘丙肽/甘丙素(GAL)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat galanin,GAL ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02259    大鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat α-Glucosidase,a-Glu ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02260    大鼠破骨細(xì)胞分化因子(ODF)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat osteoclast differentiation factor,ODF ELISA Kit     ,規(guī)格:    96T/48T
    A02261    大鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)酶聯(lián)免疫試劑盒     ,英文名:    Rat Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA Kit     ,規(guī)格:    96T/48T
    A02262    大鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)酶聯(lián)免疫試劑盒     ,英文名:    Rat Leptospira IgG,Lep IgG ELISA Kit     ,規(guī)格:    96T/48T
    A02263    大鼠熱休克因子1(HSF1)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat Heat Shock Factor 1,HSF1 ELISA Kit     ,規(guī)格:    96T/48T
    A02264    大鼠β羥丁酸(βOHB)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat Beta-Hydroxybutyric Acid,β-OHB ELISA Kit     ,規(guī)格:    96T/48T
    A02265    大鼠細(xì)胞色素P450(CYP450)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat cytochrome P450,CYP450 ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02266    大鼠生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)酶聯(lián)免疫試劑盒     ,英文名:    Rat growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin ELISA Kit     ,規(guī)格:    96T/48T
    A02267    大鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)酶聯(lián)免疫試劑盒     ,英文名:    Rat Visceral adipose-specific serine protease inhibitor,vaspin ELISA Kit     ,規(guī)格:    96T/48T
    A02268    大鼠溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)酶聯(lián)免疫試劑盒     ,英文名:    Rat Bromodeoxyuridine,BrdU ELISA Kit     ,規(guī)格:    96T/48T
    A02269    大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat transforming growth factorsβ2,TGFβ2 ELISA Kit     ,規(guī)格:    96T/48T
    A02270    大鼠細(xì)胞色素P4502E1(CYP2E1)酶聯(lián)免疫試劑盒     ,英文名:    Rat cytochrome P450 2E1,CYP2E1 ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02271    大鼠α1微球蛋白(α1-MG)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat α1-microglobulin,α1-MG ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02272    大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)酶聯(lián)免疫試劑盒     ,英文名:    Rat monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA Kit     ,規(guī)格:    96T/48T
    A02273    大鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat peroxisome prolifeRators activator receptors alpha,PPAR-α ELISA Kit    ,人 (Human) 血小板活化因子乙酰水解酶 (PAFA) ELISA 檢測(cè)試劑盒規(guī)格:    96T/48T
    A02274    大鼠鈣調(diào)素(CAM)酶聯(lián)免疫試劑盒     ,英文名:    Rat calmodulin,CAM ELISA Kit     ,規(guī)格:    96T/48T
    A02275    大鼠載脂蛋白E(Apo-E)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat Apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T
    A02276    大鼠網(wǎng)膜素(omentin)酶聯(lián)免疫試劑盒    ,英文名:    Rat omentin ELISA Kit    ,規(guī)格:    96T/48T

     

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