本試劑僅供研究使用 標本:血清或血漿 試驗原理: SDH試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知SDH濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將SDH和生物素標記的抗體同時溫育。人山梨醇脫氫酶ELISA檢測試劑盒洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中SDH的濃度呈比例關(guān)系。 自備材料 1.蒸餾水。 2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。 3.振蕩器及磁力攪拌器等。 安全性 1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。 2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。 3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。 操作注意事項 1.試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。人山梨醇脫氫酶ELISA檢測試劑盒稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。 2.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。 3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。 4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。 5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。 6.洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。 7.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。 8.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。 9.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。 樣品收集、處理及保存方法 1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。 3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。 4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 試劑的準備 標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。 2.洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。 操作步驟 1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。 2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。 3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。 4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。 5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。 6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。 7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。 8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。 9.在450nm波長處測定各孔的OD值。 局限 6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。
試劑盒性能 1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。 2. 特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。 3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。 結(jié) 果 判 斷 與 分 析 1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值 2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的SDH標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的SDH含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。 3、檢測值范圍:0-800pmol/L 4、敏感度: 1.0 pmol/L E-(Hu)(03)-02330 人類白細胞抗原A(HLA-A)elisa試劑盒 ,英文名: HLA-A ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02331 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)elisa試劑盒 ,英文名: mTOR ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02332 人酪氨酸羥化酶(TH)elisa試劑盒 ,英文名: TH ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02333 人酪氨酸激酶2(Tyk-2)elisa試劑盒 ,英文名: Tyk-2 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02334 人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)elisa試劑盒 人山梨醇脫氫酶ELISA檢測試劑盒,英文名: LAC/LA ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02335 人萊姆IgG(Lyme-IgG)elisa試劑盒 ,英文名: Lyme-IgG ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02336 人空泡毒素相關(guān)蛋白A(VacA)elisa試劑盒 ,英文名: VacA ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02337 人空腸彎曲菌黏附蛋白(PEB1)elisa試劑盒 ,英文名: PEB1 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02338 人克拉拉細胞蛋白(CC16) elisa試劑盒 ,英文名: CC16 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02339 人可提取核抗原(ENA)elisa試劑盒 ,英文名: ENA ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02340 人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)elisa試劑盒 ,英文名: sTfR ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02341 人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sTRAIL)elisa試劑盒 ,英文名: sTRAIL ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02342 人可溶性腫瘤壞死因子受體2(sTNF-R2)elisa試劑盒 ,英文名: sTNF-R2 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02343 人可溶性腫瘤壞死因子受體1(sTNF-R1)elisa試劑盒 ,英文名: sTNF-R1 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02344 人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)elisa試劑盒 ,英文名: sTNFαR ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02345 人可溶性粘附分子(Sam)elisa試劑盒 ,英文名: Sam ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02346 人可溶性血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1(sPECAM-1)elisa試劑盒 ,英文名: sPECAM-1 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02347 人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)elisa試劑盒 ,英文名: SFMC ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02348 人可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)elisa試劑盒 ,英文名: sVCAM-1 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02349 人可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)elisa試劑盒 ,英文名: sEPCR ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T E-(Hu)(03)-02350 人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)elisa試劑盒 ,英文名: VEGFR-2/sFLK-1 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
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