［摘  要］ 目的：調(diào)查慢性前列腺炎細菌感染情況及幾種主要細菌對多種抗生素的耐藥性監(jiān)測，為有效控制慢性前列腺炎提供實驗室依據(jù)，指導(dǎo)臨床用藥。方法：對385例慢性前列腺炎患者采用MearesStamey四段取樣法作前列腺液細菌培養(yǎng)和藥敏試驗，對長期使用抗生素及原因不明的感染患者加做L型細菌培養(yǎng)及藥敏試驗。結(jié)果：在385例慢性前列腺炎患者普通細菌培養(yǎng)共分離出123例陽性標本，陽性率為31.9％。葡萄球菌感染92例，占感染率23.8％（其中凝固酶陰性葡萄球菌感染64例，占16.6％；凝固酶陽性葡萄球菌感染28例，占7.2％）；鏈球菌感染18例，占4.6％，革蘭陰性桿菌感染13例，占3.4％；L型細菌培養(yǎng)12例，陽性率為3.2％；混合感染病例為11例，占2.9％。結(jié)論：慢性前列腺炎的細菌感染分布以革蘭陽性球菌為主，其中凝固酶陰性葡萄球菌所占的比例zui高；對于長期大量使用抗生素而普通培養(yǎng)陰性的患者加做L型細菌培養(yǎng)，對提高慢性前列腺炎細菌感染檢出率有重要的意義；對于細菌引起的慢性前列腺炎，在選用的抗生素中，由于不同的細菌對藥物的敏感性不同，選擇敏感的藥物對有效治療慢性前列腺炎有重要的意義。
　?。坳P(guān)鍵詞］ 四段取樣法慢性前列腺液細菌培養(yǎng)；細菌鑒定；藥敏試驗

　　慢性前列腺炎在成年男性人群中具有較高的發(fā)病率，近年來尤呈上升趨勢，是男性學(xué)科zui常見的但又難以有效治愈的嚴重疾病之一。患者病程遷延，由于長期大量使用抗生素，造成反復(fù)發(fā)作，難以治愈。我院針對臨床慢性前列腺炎患者采用Meares［4］“四段法”進行細菌培養(yǎng)及藥敏試驗并檢測細菌β內(nèi)酰胺酶、MRSA、MRCNS和ESBL，及時為臨床提供耐藥菌株信息，對合理使用抗生素和對因治療前列腺炎起到重要作用。

　　1  材料及方法

　　1.1  標本來源及樣本采集  2002年10月至2004年9月本院泌尿外科門診患者385例，年齡20歲~70歲，平均年37歲，臨床疑為慢性前列腺炎患者。取樣前先做外陰及尿道外口消毒，采用初始尿（VB1）、中段尿（VB2）、前列腺液（EPS）及終末尿（VB3）MearesStamey四段取樣法取前列腺液及尿液于無菌試管內(nèi)送檢。

　　1.2  普通細菌培養(yǎng)  分別將VB1、VB2、VB3、EPS定量接種于血瓊脂平板和巧克力平板上，（35±1）℃5%~10％二氧化碳培養(yǎng)24 h，做細菌菌落計數(shù)及細菌鑒定。以EPS+VB3的細菌計數(shù)>VB1+VB2細菌計數(shù)的2倍為陽性，否則為陰性［4］。L型細菌培養(yǎng)：對培養(yǎng)陰性，長期使用抗生素反復(fù)感染患者加做L型細菌培養(yǎng)。將EPS定量接種于L型高滲增菌培養(yǎng)基，（35±1）℃ 5%~10%二氧化碳培養(yǎng)6 d內(nèi)觀察結(jié)果，培養(yǎng)增菌液混濁或附壁細菌生長時，轉(zhuǎn)種于血平板或L型固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基來來源：L型高滲增菌培養(yǎng)基：衛(wèi)生部上海生物制品研究所產(chǎn)生。L型固體培養(yǎng)基：新鮮牛肉浸液80 ml，蛋白胨2 g，氯化鈉5 g，瓊脂0.8 g，明膠3 g加熱溶解后，校正pH 7.4~7.6，121 ℃高壓滅菌20 ml，待冷至56 ℃左右時，加入滅活人血漿20 min，傾注平板，冷卻后放4 ℃冰箱備用。

　　1.3  菌株鑒定及藥敏試驗  采用湖南天地人公司提供半自動細菌鑒定儀及鑒定板，包括細菌鑒定及藥敏試驗，ESBL及β內(nèi)酰胺酶檢測。質(zhì)控菌株為金葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853，由河南省臨床檢驗中心提供。

　　2  結(jié)果

　　2.1  鑒定結(jié)果  在385例慢性前列腺炎患者中分離出123例陽性標本，陽性率為31.9%。其中葡萄球菌感染92例，占感染率23.8％（其中凝固酶陰性葡萄球菌感染64例，占16.6%；凝固酶陽性葡萄球菌感染28例，占7.2％）；鏈球菌感染18例，占4.6％；革蘭陰性桿菌感染13例，占3.4％，見表1。

　　2.2  藥敏試驗  見表2。

　　2.3  L型細菌培養(yǎng)結(jié)果  共培養(yǎng)出12例，陽性率為3.2％。其中腸球菌感染6例，表皮葡萄球菌感染4例，金葡萄球菌感染1例，中間型葡萄球菌1例。

　　2.4  混合感染病例  123例陽性結(jié)果中有11例為混合感染病例，其中腸球菌與表皮葡萄球菌感染2例，溶血葡萄球菌與大腸埃希菌感染2例，表皮葡萄球菌與中間型埃希菌感染2例，金葡萄球菌與表皮葡萄球菌感染2例，奇異變形桿菌與大腸埃希菌感染1例，表皮葡萄球菌與草綠色鏈球菌感染1例。

　　表1  123例慢性前列腺液中病原菌的種類及所占比例（略）

　　2.5  MRS檢測結(jié)果  在凝固酶陽性葡萄球菌感染28例，MRSA13例，占46.4%；凝固酶陰性葡萄球菌感染64例，MRSCNS 20例，占31.2％。β內(nèi)酰胺酶檢測，葡萄球菌陽性25例，占27.1％；陰性67例，占72.9%。

　　3  討論

　　慢性前列腺炎是成年男性常見的疾病，以發(fā)病緩慢，病因病理復(fù)雜，反復(fù)發(fā)作，經(jīng)久難愈為特點，前列腺炎分為細菌性前列腺炎和非細菌性前列腺炎兩類，臨床上以非細菌性前列腺炎為主。近年來，隨著抗生素的廣泛使用及性病的蔓延，細菌性前列腺炎比率在逐年增高。因此了解慢性前列腺炎細菌的感染情況，選用敏感的抗生素對因治療，對慢性前列腺炎的治療有極其重要的臨床意義。

　　20世紀60年代后期，Meares等［4］提出了下尿路感染定位診斷的“四段法”，并被視為確定前列腺細菌感染的金標準。從本組“四段法”分離的123例病例的檢查結(jié)果看，慢性前列腺炎患者前列腺液細菌培養(yǎng)陽性率31.9％較高，并以革蘭陽性菌多見，主要是凝固酶陰性葡萄球菌，腸桿菌和鏈球菌也占有相當?shù)谋壤?。目前臨床上已有大量資料證明葡萄球菌是細菌性前列腺炎的主要致病菌［2，3］。本組試驗中分離葡萄球菌92例，其中凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）感染64例，表皮葡萄球菌占39例，占10.1％。由于患者長期使用抗生素，使普遍認為沒有致病性的凝固酶陰性的表皮葡萄球菌成為機會感染的重要病原菌。表皮葡萄球菌能產(chǎn)生粘質(zhì)物，粘質(zhì)解體后，可使細菌粘附于細胞表面，能保護細菌免受中性粒細胞的吞噬和減弱抗生素的滲透性，促進了CNS的感染，使之在一定條件下成為機會感染的重要條件致病菌。表皮葡萄球菌在男性前列腺炎的致病特性，應(yīng)引起臨床的高度重視。凝固酶陽性葡萄球菌感染28例，感染率占7.2％；其次為鏈球菌感染18例，感染率為4.6％；革蘭陰性桿菌感染13例，感染率3.4％。

　　對EPS細菌培養(yǎng)陽性者，應(yīng)根據(jù)藥敏試驗選擇合適的抗生素進行治療。本試驗MRS檢測表明MRSA46.4％，MRSCNS 31.2％；β內(nèi)酰胺酶檢測陽性為27.1％。由于MRSA對β內(nèi)酰胺酶類抗生素不論藥敏結(jié)果如何均視為耐藥，所以在治療MRSA、MRSCNS感染時有選擇的抗生素范圍很窄。以往認為的治療慢性細菌性前列腺炎，大環(huán)內(nèi)酯類、復(fù)方新諾明和喹諾酮類等是比較好的藥物。但從耐藥性監(jiān)測表明，對于革蘭陽性球菌引起的慢性前列腺炎，青霉素和紅霉素，喹諾酮類藥物（環(huán)丙沙星與氧氟沙星），葡萄球菌均顯示較高的耐藥性，已不能作為治療用藥，從藥敏分析可以看出，二、三代頭孢與三代喹諾酮的左氧氟沙星耐藥率低，可以作為經(jīng)驗性治療用藥；對于腸桿菌科細菌引起的慢性前列腺炎，腸桿菌科細菌均對氨芐西林顯示*的耐藥性，而對其他β內(nèi)酰胺類抗生素均較敏感，因此二、三代頭孢菌素與三代喹諾酮左氧氟沙星是比較好的治療藥物，慶大霉素和環(huán)丙沙星可作為次選藥物。另外，在所有的腸桿菌科細菌當中，未檢出產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶（ESBL）菌株。在鏈球菌屬中（以腸球菌為主），細菌對青霉素、氨芐西林、高劑量慶大霉素及萬古霉素較敏感，可作為及次選藥物，而對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素、四環(huán)素類抗生素、利福平與克林霉素均顯示較高耐藥率。本試驗未檢出耐萬古霉素的腸球菌（VER）。

　　在一般細菌培養(yǎng)陰性者除考慮厭氧菌、支原體與衣原體外，L型細菌感染可能也是重要的因素。本實驗在檢測陽性的L型EPS細菌培養(yǎng)中已初步得到證實，因此對原因不明前列腺炎者除做EPS常規(guī)細菌培養(yǎng)外，應(yīng)同時進行L型細菌的培養(yǎng)，這對提高確診率，減少漏診誤診很有必要。本文檢測了385例慢性前列腺炎患者的EPS，其中按常規(guī)方法培養(yǎng)細菌，陰性率為68％（262例），在262例常規(guī)培養(yǎng)陰性的標本中，細菌L型培養(yǎng)則又培養(yǎng)到12例L型細菌，占4.5％（12／262）。表明對慢性前列腺炎患者在做細菌常規(guī)培養(yǎng)的同時，進行細菌L型培養(yǎng)，可提高檢出率。尤其是接受過各種抑制細胞壁合成的抗生素治療的患者，已使細菌呈不同程度的缺壁狀態(tài)，細菌常規(guī)培養(yǎng)可能呈陰性。故建議在臨床上對慢性反復(fù)發(fā)作、經(jīng)久難愈的前列腺炎患者，應(yīng)加做細菌L型培養(yǎng)。

　　慢性前列腺炎混合感染是疾病久治不愈、細菌耐藥性增高的因素之一，主要表現(xiàn)為細菌性和非細菌性病原體感染同時存在，兩種細菌同時存在的混合感染。本試驗結(jié)果表明123例陽性結(jié)果中就有11例為混合感染病例（其中有陽性球菌與陰性桿菌，凝固酶陽性的葡萄球菌與凝固酶陰性的葡萄球菌，腸球菌與葡萄球菌等）。因此，對慢性前列腺炎病程較長的患者，臨床更應(yīng)注重前列腺液細菌學(xué)的檢測，針對病因進行有效治療是一個重要的環(huán)節(jié)。由此可見EPS的細菌學(xué)檢測對臨床診治慢性前列腺炎具有重要意義。抗生素是治療慢性前列腺炎的常用方法，但不可忽視醫(yī)源性前列腺炎在目前慢性前列腺炎中所占比例逐漸增高的事實。文獻報道，在院內(nèi)感染中革蘭陽性球菌感染呈逐年上升趨勢，而在慢性前列腺炎感染方面，這種現(xiàn)象更為突出。其原因無不與臨床上大量濫用抗生素，引起多重耐藥性相關(guān)。慢性前列腺炎患者病程越長，應(yīng)用抗生素種類越多，其耐藥性越高。所以，選用恰當?shù)乃幬?，?guī)范、針對性用藥，對防止慢性前列腺炎的遷延和復(fù)發(fā)有重要意義。