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 下面是我司為大家講述一些牛熱休克蛋白90(HSP90)原理ELISA kitELISA實驗中的小技巧，希望對大家有所幫助！

1. 操作前應(yīng)對實驗的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度(保持在18C～25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數(shù)等，要先查看水育箱溫度，ELISA試劑盒是否符合要求。

2. 正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑，避免刮擦包被板底部。

3. 加樣過程中避免液體外濺，血清殘留在反應(yīng)孔壁上，加樣器吸頭要清洗干凈，避免污染，加樣次序要與說明書一致，否則可導(dǎo)致結(jié)果錯誤，實驗重復(fù)性差。

4. 手工洗板加洗液時沖擊力不要太大，洗滌次數(shù)不要超過說明書推薦的洗滌次數(shù)，洗液在反應(yīng)孔內(nèi)滯留的時間不宜太長。不要使洗液在孔間竄流，造成孔問污染，導(dǎo)致假陰性或假陽性。

5. 要保證加液量一致ELISA試劑盒我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn)，造成顯色不統(tǒng)一，判斷錯誤。

6. 顯色液量不可過多加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下，加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng)，顯色液量不能過多，以免顯色過強(qiáng)。
 

牛熱休克蛋白90(HSP90)原理ELISA kit間接法測抗體步驟：

間接法是檢測抗體常用的方法，其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體(二抗)以檢測與固相抗原結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法，操作步驟如下：

1）將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗原，洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。

2）加稀釋的樣本，保溫反應(yīng)，樣本中的特異抗體與固相抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物，

3）經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體，樣本中的其他成份在洗滌過程中被洗去。

4）加酶標(biāo)抗抗體，固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)抗抗體結(jié)合，從而間接地標(biāo)記上酶，洗滌后，固相載體上的酶量與樣本中受檢抗體的量正相關(guān)。

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